幸运飞艇

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  • HUVEC-C细胞株,人脐静脉内皮细胞说明书
  • 点击次数:180 发布时间:【2019-04-29】
  •     HUVEC-C细胞株,人脐静脉内皮细胞说明书

        慧颖生物热卖中,提供STR鉴定报告,来源正规,售后跟踪及时到位,以下为操作说明

    生长特性

    贴壁  上皮样

    培养条件

    培养基:ENDOTHELIAL CELL MEDIUM(Sciencell,1001)

    温度:37℃     气相:95%空气,5% CO2

    传代

    1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-2小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;

    2.待细胞长至80-90%时,需要对其进行传代,推荐传代比例为1:3至1:4 ;

    3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为佳消化时间,记录佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心5min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

    保存

    冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

    (备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

    保存条件:液氮存储

    供应限制

    仅供研究之用

    常见问题及解决方案

    1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

    2.收到细胞后尽快更换为含新鲜培养基,不可使用瓶内旧培养基

    3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

主营产品:细胞株、Hs578Bst细胞、ND7/23细胞、bel-7407细胞、EA.hy926细胞、A2780细胞、人肝癌细胞株、RAW264.7细胞、NB4细胞、Sp2/0细胞、KYSE30细胞
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