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  • RAW264.7细胞形态,RAW264.7细胞株操作说明
  • 点击次数:262 发布时间:【2019-04-29】
  • RAW264.7细胞形态,RAW264.7细胞株操作说明RAW264.7细胞形态

    操作说明:

    收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

    (一)  如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

    (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

    1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

    3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。

    注:1、观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

    2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

    3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

    4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。

    运输保存:

    采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细

    胞,切不可将细胞置于高温环境。

    注意事项

    1 )操作前要洗手,进入超净台后手要用 75% 酒精或 0.2% 新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。

    2 )点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具

    不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。

    3 )操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。

    4 )不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。

    5 )瓶子开口后要尽量保持 45℃ 斜位。

    6 )吸溶液的吸管等不能混用 。

    慧颖生物常卖细胞:

     SV40-MES-13    小鼠肾小球系膜细胞  DMEM/F12+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

    LLC 小鼠lewis肺癌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

    GL261   小鼠胶质瘤细胞  DMEM/F12+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

    Neuro-2a    小鼠脑神经瘤细胞    MEM+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

    L929    小鼠结缔组织L细胞株929克隆 MEM+10% FBS 贴壁    上皮细胞样

    MC38    小鼠结肠癌细胞  DMEM+10% FBS    悬浮+贴壁   上皮细胞样

    B16-F10 小鼠皮肤黑色素瘤细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

    MEL 小鼠红白血病细胞    RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

    NCTC 1469   小鼠正常肝细胞  DMEM+10% HS 马血清  贴壁    淋巴母细胞

    STC-1   小鼠小肠内分泌细胞  DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

    Hepa 1-6    小鼠肝癌细胞    DMEM+10% FBS    贴壁    上皮细胞样

    Ana-1   小鼠巨噬细胞    RPMI-1640+10% FBS   悬浮+贴壁   淋巴母细胞

    Sp2/0-Ag14  小鼠骨髓瘤细胞  DMEM+10%FBS 悬浮+贴壁   淋巴母细胞

    MPC-5   小鼠足细胞  DMEM+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

    HL-1    小鼠心肌细胞    DMEM+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

    CT26    小鼠结肠癌细胞  RPMI-1640+10% FBS   贴壁    上皮细胞样

    BAF3、BA/F3 小鼠原B细胞株  RPMI-1640+10% FBS+10ng/ml IL-3 悬浮    淋巴母细胞

    BALB/3T3 clone A31  小鼠胚胎成纤维细胞  DMEM+10%FBS 贴壁    成纤维细胞

    C17.2   小鼠神经干细胞  DMEM+10%FBS 贴壁    成纤维细胞

    C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纤维细胞  MEM+10%FBS  贴壁    成纤维细胞

    RENCA   小鼠肾癌细胞    1640+10%FBS+0.1mM 非必需氨基酸+1mM 丙酮酸钠+2mM L-谷氨酰胺+1%P/S    贴壁    上皮细胞样

    IMCD3   小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞    DMEM/F12+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

    MB49    小鼠膀胱癌细胞  DMEM+10%FBS 贴壁    上皮细胞样

     

     

主营产品:细胞株、Hs578Bst细胞、ND7/23细胞、bel-7407细胞、EA.hy926细胞、A2780细胞、人肝癌细胞株、RAW264.7细胞、NB4细胞、Sp2/0细胞、KYSE30细胞
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