幸运飞艇

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  • hePal-6细胞,小鼠肝癌细胞 传代说明
  • 点击次数:269 发布时间:【2019-07-10】
  • hePal-6细胞,小鼠肝癌细胞 传代说明 慧颖生物所有细胞产品,血清,培养基,胰酶,双抗年中大促,更多好礼相送!

    • 组成:

    组份

    数目

    细胞

     1 T-25

    细胞说明书

    一份

    • 细胞简介:

    生长特性:

    贴壁生长,贴壁性不牢

     

    培养条件:

    培养基:90%1640 +10%FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清 货号:HN-FBS-50

    气相:空气95%,二氧化碳5%

    温度:37

    培养:

    一、贴壁细胞

    1.75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;

    2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2

    3传代步骤:将0.25%EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

     

    二、悬浮细胞

    1.75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;

    2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);

    3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,第一次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。

     

    细胞总数:

    1~3*106

    传代周期:

    2-3

    传代比例:

    1:2~13

    换液频率:

    2-3

    冻存液:

    90%FBS+10%DMSO

     

    四、注意事项:

    1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

    2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养

    3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。

    4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。

    5 因细胞产品的特殊性,如客户对本公司细胞质量存有疑问,请于收到细胞后一个月内与本公司销售联系,超过时间段,本公司则默认细胞质量优良,不承担因细胞产生的任何责任。

主营产品:细胞株、Hs578Bst细胞、ND7/23细胞、bel-7407细胞、EA.hy926细胞、A2780细胞、人肝癌细胞株、RAW264.7细胞、NB4细胞、Sp2/0细胞、KYSE30细胞
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